生物顯微鏡-細(xì)胞大小的測量

一、實驗?zāi)康?/p>

1學(xué)會測微尺的使用和計算方法。

2．掌握鴨血細(xì)胞大小測定的方法。

二、實驗原理

應(yīng)用顯微鏡的成像原理，同時借助生物顯微鏡的鏡臺測微尺和目鏡測微尺，兩尺配合使用．進(jìn)行測量和運算，得出細(xì)胞的大小。

鏡臺測微尺是小央部分副有等分線的載玻片。一般將1mm等分為100格(或2mm等分為200格)，每格長度等于0.01mm(即10μm)。是于校正目鏡測微尺誨格長度的。

目鏡側(cè)微尺是一缺可放在接目鏡內(nèi)的隔板上的圓形小玻片，其中央刻有的刻度，有等分50小格或100小格兩種，每5小格間有一長線相隔。由了所用接目鏡放大倍數(shù)和接物鏡放大倍數(shù)的不同．目鏡測微尺每小格所代表的實際長度也就不同，因此，目鏡測微尺石能直接用來測量微生物的大小，在位用前必須用鏡臺測微尺進(jìn)行校正，以求得在一定放大倍數(shù)的接目鏡和接物鏡廠該日鏡測微尺每小格的相對值．然后才可用來測量微牛物的大小。

三、實驗用品

1．儀器

(1)目鏡測微尺(2)鏡臺測微尺(3)生物顯微鏡(4)擦鏡紙

2．試劑勺材料

(1)鴨血細(xì)胞涂片(2)香柏油(3)瑞氏—古姆薩染液(4)15mol／L硼酸緩沖液(5)生理鹽水(6)蒸餾水(7)二甲苯

四、實驗方法與步驟

1．目鏡測微尺的標(biāo)定

(1)放置目鏡測微尺取小接目鏡，旋開接目鏡透鏡．將目鏡測微尺的刻度朝下放在接目鏡筒內(nèi)的隔板上，然后旋上接目透鏡，zui后將此接日鏡插人鏡筒內(nèi)。

(2)放置鏡臺測微尺將鏡臺測微尺置于顯微鏡的載物臺卜，使刻皮面朝上。

(3)校正生物顯微鏡目鏡測微尺先用低倍鏡觀察，對準(zhǔn)餒距，當(dāng)看清攪臺測微尺后，轉(zhuǎn)動接口鏡，使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度平行，移動推動器，使目鏡測微尺和笛臺測微尺的某一區(qū)間的兩對刻度線*重合，然后計數(shù)出兩對重合線之間各自所占的格數(shù)。

根據(jù)計數(shù)得到的目鏡側(cè)微尺和鏡臺側(cè)微風(fēng)至合線之間各自所占的格數(shù)，通過如下公式換算小目鏡測微尺每小格所代表的實際氏度。

同法校正在高倍鏡和油鏡下目鏡測微尺每小格所代表的長度。

2．鴨血細(xì)胞大小的測定

(1)將已經(jīng)制備好的鴨血涂片放在染色盤梁上，滴數(shù)滴瑞氏—吉姆薩染液欲涂片上色1分鐘，滴加等量1／15mol/L磷酸緩沖液，用茍；簽輕輕攪拌混勻，再靜置染色5—10分鐘清水緩緩沖洗1分鐘，傾斜放量．晾十后進(jìn)行觀察測量。

(2)生物目鏡測微尺校正后，移去鏡臺測微尺，換上鴨血涂片，校正焦距使細(xì)腦清晰，轉(zhuǎn)動目鏡測微尺(或轉(zhuǎn)動染色標(biāo)本)，測出鴨血細(xì)胞的長和寬各占幾小格，將測得的格數(shù)乘以目鏡側(cè)微尺每小格所代表的長度，即可換算出此單個細(xì)胞的大小值。

在側(cè)量時應(yīng)注意將被測量的標(biāo)本移放到視野中心，因為在這個位置上鏡像zui消晰，像茹也zui小，為減少誤差，在測量間一被揪物時，要逗3次以上，采用其平均值。還要注意視野中的先度應(yīng)均勻勁，以免標(biāo)尺分度左右兩側(cè)的亮度不同而影響肺確測量值的得州。

3．取以目鏡側(cè)微尺，將接目鏡放凹鏡筒，再將懶境側(cè)微尺和鏡臺洲微尺分別用挨鏡紙擦拭后，放間盒內(nèi)保存。

注意事項：不同物鏡下口鏡測微尺代表的大小不同。

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