徠卡熒光顯微鏡的性能特點及熒光顯微術的特點
徠卡顯微鏡是任何顯微術的基本工具,它的主要作用是使被檢標本圖象得到不同程度的放大。在徠卡熒光顯微術中,徠卡熒光光源裝置是提供一定波長的激發(fā)光使被檢標本受激發(fā)射熒光,再通過徠卡顯微鏡的物鏡,目鏡系統(tǒng)使熒光圖象放大以供觀察,因此,一般來說,任何顯微鏡都可以用于熒光顯微術。不過,由于徠卡熒光顯微鏡所放大的象是熒光圖象,必須根據(jù)熒光產生和表現(xiàn)的特點,因此在使用方法上略有講究。
熒光顯微術是普通顯微術的重大發(fā)展。它具有*的*性。熒光顯微術是在黑暗的背景下觀察標本的彩色圖像,有良好的反襯,故觀察清楚、方便,易于鑒別,眼睛也不易疲勞。由于熒光染色素的濃度極?。▋x1:100000)便能發(fā)出明亮的熒光,因此一般油機體眾說是無毒的,為活體觀察,如研究功能器官的過程和細微結構,某些代謝過程的變化等,提供了廣泛的可能性。另外,熒光色素染色法比較簡單,時間短,標本制作容易,特別適于快速工作,如傳染病的快速診斷等。
(1)熒光顯微術方法的選擇徠卡熒光顯微鏡可用明場或暗場方法,—般用暗場效果較好,因為它產生的現(xiàn)場背景是黑的,圖象反襯強,不過沒有明場方便。至于透射熒光還是反射熒光,一般來說,反射熒光應用范圍廣一些,它不僅適用觀察普通標本片,而且還能現(xiàn)察不適明標本。
(2)結果記錄方法徠卡熒光顯微術所觀察的熒光圖象,主要以兩個指標判斷結果,一是形態(tài)學特征,二是熒光的亮度。在免疫熒光工作中,尤其是這樣,必須將兩者結合起來綜合判斷,不可偏廢。結果記錄是根據(jù)主觀指標或客觀指標,但一般常是憑工作者目力觀察的主觀指標由于這是定性的觀察,所以記錄的度較差。
隨著科學技術的發(fā)展,采用客觀指標記錄結果已開始應用。
①用不同厚度的中性濾片插入激發(fā)濾片和標本之間的光路中,以看熒光減弱的極度;
②不同標本以相同的曝光時間進行顯微攝影,然后用光密度計測定膠卷圖象;
③直接用熒光計測熒光色素和兔疫熒光染色的鏡下標本;
④用光敏電池曝光表測定圖象的亮度,或者與掃描裝置結合,對視場的特定部位進行掃描等,如熒光顯微光度計。
備注:徠卡熒光顯微鏡的熒光顯微術的部分文章由北京中儀光科科技發(fā)展有限公司編輯整理上傳。
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